西森美康CA50半自动血凝仪说明书和培训PPT（中文） CA-50培训 50页

'CA-50自动凝血分析仪1 CA-50血凝仪—正常的止血机制正常止血功能是维持生命所必须的生理功能，包括三个基本因素：血管收缩血小板凝聚成白色血栓形成纤维蛋白凝块整个止血过程大致可分为四期：血管期血小板期血浆期(血液凝固期)血栓动力学变化期上述过程同时触发，相互关联而交织，不能截然分开2 止血：由出血开始到出血停止的整个过程凝血：血浆形成纤维蛋白凝块的过程“瀑布”学说：凝血是一系列凝血因子依次相继被激活的过程，分为三个阶段：第一阶段：凝血活酶的形成第二阶段：凝血酶原转变为凝血酶第三阶段：纤维蛋白原转变成纤维蛋白CA-50血凝仪—止血与凝血机制：3 内源凝血系统表面接触ⅫⅫaⅪⅪaⅨⅨaCa+++Ⅷ+Ca+++PF3ⅩⅩa+Ⅴ+Ca+++PF3血小板凝聚并释放凝血活酶凝血酶原（II）第一阶段Ⅹ磷脂凝血酶（IIa）Ⅶ+Ca++蛋白质部分外源凝血系统组织因子第二阶段XIII纤维蛋白原纤维蛋白单体可溶性纤维蛋白XIIIa+不溶性纤维蛋白多肽A、B第三阶段Ca++凝块KHB科华生物Ⅹa+Ⅴ+Ca+++CA-50血凝仪—止血和凝血机制：凝血过程4 CA-50血凝仪—止血和凝血机制：凝血因子5 常用筛选检测：简易、快速、费用低廉PT:凝血酶原时间APTT：活化部分凝血活酶时间Fbg：纤维蛋白原含量TT：凝血酶时间Plt：血小板计数Fdp：纤维蛋白降解产物PT,APTT,Fbg,TT常作为凝血机制的四个常规项(简称凝血四项)凝血实验的进展—凝血机制测定的内容6 确诊检测：特异、较繁琐、费用较高内源性、外源性凝血因子TTO、NT、AT-Ⅲ、PLG、α2-AP、PC、FDP、D-二聚体其他:血管病变、血小板功能估计、纤溶系统检查凝血实验的进展—凝血机制测定的内容7 凝血实验的进展—凝血机制测定的内容PT,APTT,Fbg,TT常作为凝血机制的四个常规项目(简称凝血四项)8 以PT秒数(S)报告；可同时报正常人PT秒数(S)以患者血浆PT(S)/正常对照PT(S)的比率(PTR)报告在口服华法令类抗凝药物治疗监控时，应报告国际标准化比率(INR)INR=PTRISIINR=Antilog(ISI×logPTR)ICSH规定，不再用稀释曲线或百分比(活动度)报告凝血实验的进展—PT测定报告方式的标准化9 国际敏感度指数(ISI)为使不同敏感性的组织凝血活酶在检测中能得到同样的结果所制定的共同敏感性指标凝血实验的进展—PT测定中的ISI10 病人秒数PTRINRISI2.5试剂20.81.663.55ISI1.2试剂35.62.873.54ISI1.0试剂42.33.503.50关于用INR报告PT检测结果11 关于用INR报告PT检测结果—INR的优势：1.INR可以直接反映最合适的抗凝剂使用剂量(1.5~3.0),增加病人的安性。12 凝血实验的进展—PT-INR的指导意义13 关于用INR报告PT检测结果—INR的优势：2.使用INR报告PT，可纠正由不同类仪器、不同试剂所产生的结果差异和变化(INR=PTRISI)实现实验室间结果的标准化和可比性14 凝血实验的进展—仪器特有的ISI仪器特有ISI同一种PT试剂在不同的仪器上测定，其ISI是不同的，不同仪器的ISI数值就是“仪器特有的ISI”“仪器特有ISI”的标定：采用已标有INR的冻干血浆，对“仪器特有的ISI”进行标定，以使结果具有可比性。15 凝血实验的进展—仪器特有的ISI不同仪器的“仪器特有ISI”数值：仪器型号ISI数值SYSMEXCA-501.05CA-5001.05CA-15001.02CA-60001.01某磁珠法血凝仪1.21资料来源：DadeBehringPT试剂说明书16 凝血实验的进展—PT测定中的ISI规定试剂生产厂商的产品必须标有ISIISI愈接近1.0，试剂愈敏感。敏感的试剂可得到较好的准确度和精确度。建议选用接近1.0的试剂。ISI越大，INR换算的误差也越大17 PT对临床诊断和治疗的意义口服抗凝剂的监测————INR肝疾患严重程度的分类————延长秒数重症肝炎的诊断标准————活性%DIC诊断标准————PT比外因系出血筛选————秒数和PT比手术前常规检查————秒数和PT比凝血实验的进展—凝血测定：PT测定的意义18 APTT对临床的意义肝素治疗的监测APTT比(1.5~2.5)内源性出血筛选ⅧⅨⅪⅫ手术前常规(代替凝血时间)血栓倾向的诊断抗凝物质的检测（狼疮抗凝因子等）DIC的诊断凝血实验的进展—凝血测定：APTT测定的意义19 Fbg对临床的意义机体感染、炎症的诊断心脑血管疾病的诊断血栓倾向的诊断抗凝物质的检测DIC的诊断TT对临床的意义抗凝物质的检测及抗凝治疗的监控凝血实验的进展—凝血测定：Fbg、TT测定的意义20 仪器仪器检测检测原理生物学检测原理(凝固法)生物化学检测原理(发色底物法)免疫学检测原理生物学原理(凝固法)检测电流法磁珠法即粘度法光学法凝血实验的进展—凝血测定的检测方法21 第一阶段：对手工方法的简单模仿—电流测定法将两个正负电极插入检测样品中，其中一个电极上下运动，两个电极都在反应液中时电流接通，离开时电流切断。样本凝固后，电极上升时钩起纤维蛋白丝使两个电极保持连接使电流仍然接通。此即为检测终点。带钩的电极凝血实验的进展—自动凝血测定手段的发展上下往复运动22 第二阶段：通过物理特性的变化进行检测—磁珠法检测杯中放一磁珠，与杯外金属杆紧贴成一直线，标本凝固后，由于纤维蛋白形成使磁珠移位而偏离金属杆，被仪器检出为凝固终点。如图所示：金属杆恒温器转动轴凝血实验的进展—自动凝血测定手段的发展磁珠23 第三阶段：采用最具敏感性的检测手段(一)光学透射比浊法：当样品杯中的血浆在凝固过程中纤维蛋白原变成纤维蛋白时，透射光的强度减小，仪器定时记下光强值，然后自动报告凝固的最初终点。光源平行光栅样本试剂光电探测器放大器显示器凝血实验的进展—自动凝血测定手段的发展24 第三阶段：采用最具敏感性的检测手段(二)光学散射比浊法：当样品杯中的血浆在凝固过程中由纤维蛋白原变成纤维蛋白时，散射光的强度增大，仪器定时记下光强值，然后自动报告凝固的最初终点。散射光强度时间STEP1STEP2STEP3STEP4标本发射光二极管光电二极管凝血实验的进展—自动凝血测定手段的发展25 刚加入试剂，凝固反应还没开始时的散射光水平为0%，凝固反应结束后的散射光水平为100%，把50%作为凝固时间。正常标本异常标本散射光强度时间时间100%0%0%0%100%100%乳糜血浆低纤维蛋白原血浆凝血实验的进展—百分比凝固点检测方式26 只要散射光有微弱的变化，就能检测出凝固时间。当标本含有干扰物(黄疸、溶血、高脂血症等)时，作为起始点0%的基线会随之上移。当测定低纤维蛋白原血症的特殊标本时，作为起始点0%的基线会随之下移。具有很强的抗干扰能力，解决了早期光学法抗干扰能力差，无法测定异常标本的问题。凝血实验的进展—百分比凝固点检测方式：特点27 SYSMEXCA-50自动凝血分析仪28 1984CA-1001985CA-30001986CA-40001990CA-50001992CA-10001996CA-60001997CA-500Series1998CA-1500Series1999CA-50Series2000CA-7000SeriesSYSMEX凝血分析仪—发展历程29 —二十一世纪的血凝分析装置Sysmex公司1999年最新推出。集半自动血凝仪各家之长，达到全自动的精密度。灵敏度高，重复性好，集成度高，操作简便。CA-50自动凝血分析仪30 早期半自动血凝仪的问题每个人做的结果不一样重复性及准确性较差的影响因素：无搅拌功能标本加温时间不定添加试剂时间不定添加试剂产生气泡影响结果无处理黄疸、溶血、高脂血标本的功能注：准确性差的半自动做发色底物方法无意义CA-50自动凝血分析仪—特性：准确的检测结果31 散射光加百分比(去本底)测定原理：黄疸、溶血、高脂血症标本也可准确测定。半自动的仪器，全自动的精确性：添加试剂时，通过感应器自动振动，使试剂同血浆充分混匀。预温、混匀、测试均在检测部进行，从而避免人为误差。预温时间、试剂添加最佳时间，仪器自动告知。通过移液器导板最佳角度添加试剂，防止气泡影响结果。两种纤维蛋白原测定方法:PT演算法(derive法)——节约试剂。国际标准定量法(clauss法)——可对高值、低值标本准确定量。四通道、半量法、二重测定(报告平均值)：可4个项目同时测定，半量法节约试剂。中文提示、打印机内置CA-50自动凝血分析仪32 测试功能：PT、APTT、Fbg、TT、TTO、NT外源因子(II、V、VII、X)量内源因子(VIII、IX、XI、XII)量运算功能：凝血试验活性百分比肝激酶活性百分比纤维蛋白原浓度(mg/dL、g/L)PT比、INR打印功能：内置打印机，可打印测试结果、质控图校及标准曲线等。质控功能：三种质控文件(QC1-QC3),每个文件可存50个数据，14个测试项目。CA-50自动凝血分析仪33 CA-50较好地解决了早期半自动血凝仪存在的准确性和精确性的问题采用敏感、抗干扰的光学散射光测定和百分比凝固点检测方法，具有处理黄疸、溶血、高脂血标本的功能添加试剂后，能进行及时、充分的混合。对加热、恒温的位置和时间予以标准化处理，并且预温和反应能在同一个位置进行。对试剂添加时间予以标准化处理，并对操作者进行提示固定试剂的添加角度和位置，避免产生气泡影响结果确保仪器具有更低的运行成本和更高的性能价格比CA-50自动凝血分析仪—特性：准确、精确的检测结果34 血红蛋白对CA-50测定结果的影响资料来源：中华检验医学杂志2000年9月第23卷第5期，P315~317CA-50自动凝血分析仪—特性：强大的抗干扰能力35 CA-50自动凝血分析仪—特性：强大的抗干扰能力乳脂蛋白对CA-50测定结果的影响浓度单位：Formazine浊度单位资料来源：中华检验医学杂志2000年9月第23卷第5期，P315~31736 CA-50自动凝血分析仪—特性：强大的抗干扰能力游离胆红素对CA-50测定结果的影响资料来源：中华检验医学杂志2000年9月第23卷第5期，P315~31737 CA-50自动凝血分析仪—特性：强大的抗干扰能力结合胆红素对CA-50测定结果的影响资料来源：中华检验医学杂志2000年9月第23卷第5期，P315~31738 资料来源：中华检验医学杂志2000年9月第23卷第5期，P315~317质控物为正常水平的质控物CA-50自动凝血分析仪—特性：精确的检测精度39 资料来源：中华检验医学杂志2000年9月第23卷第5期，P315~317质控物为异常水平的质控物CA-50自动凝血分析仪—特性：精确的检测精度40 资料来源：中华检验医学杂志2000年9月第23卷第5期，P315~317CA-50自动凝血分析仪—与CA-6000的相关性(PT测定)41 资料来源：中华检验医学杂志2000年9月第23卷第5期，P315~317CA-50自动凝血分析仪—与CA-6000的相关性(APTT测定)42 资料来源：中华检验医学杂志2000年9月第23卷第5期，P315~317CA-50自动凝血分析仪—与CA-6000的相关性(Fbg测定)43 CA-50自动凝血分析仪—与CA-500的相关性(TT测定)44 CA-50具有良好的检测精密度与CA-6000、CA-500等全自动血凝仪的测定结果具有良好的相关性干扰试验结果表明，CA-50具有较强的抗干扰能力资料来源：中华检验医学杂志2000年9月第23卷第5期，P315~317CA-50自动凝血分析仪—结论45 由于仪器、试剂不同，很难统一规定参考值实验室参考值每年或实验条件变化时应建立实验室参考值参考值测定的一切条件均应与患者测定条件相同健康供血者：至少20个18~55岁男性和非妊娠、月经期妇女，不服药并在平静状态下采血。应分开几天采血、测定，以减少天间误差用统计学处理测定结果：2SD或95%可信限为参考范围。对3SD应结合实际情况进行评估。CA-50自动凝血分析仪—讨论：参考值的建立46 采血试管、注射器及血浆容器应用硅化玻璃或塑料制成。针头不应小于21Gauge(0.81mm)。采血前不应拍打前臂。采血要顺利，不可损伤血管及周围组织，致使组织液混入血液。血凝检查要用第二管血。枸橼酸钠液(3.8%)与血液比为1:9,轻轻颠倒混匀。(HCT<200时，使用5.32%的抗凝剂；HCT>600时，使用2.19%的抗凝剂)标本应新鲜，一般要求自采血到测定在4小时内完成。血浆冷藏时最好在零下70OC。CA-50自动凝血分析仪—讨论：标本的采集47 试剂从冰箱中拿出，应先在室温中放置10~20分钟后才用(包括纤维蛋白原缓冲液)。机器的预温时间5~30分(根据室温不同)，预温完毕后机器会显示。试剂在预热槽中预温应超过10分钟，小于40分钟(APTT试剂小于20分钟)。试剂溶解但不复溶可保存一周，复溶后则只可保存一天。CA-50自动凝血分析仪—讨论：试剂的保存48 演算法Fbg线性范围：2~4g/L。实验证实在此范围内与Fbg的Clausse定量法测定的相关性很好。演算法Fbg的优点：节省试剂。测PT的同时提供,可用于筛选Fbg含量是否正常,快捷,方便。演算Fbg的缺点：线性范围窄，异常结果必须定量才准确，所以不适用于治疗监测等应用演算法Fbg(D-Fbg)的作用(1)49 Clausse定量法Fbg线性范围：0.25~9.0g/LClausse定量法的优点线性范围宽，可满足于治疗监测和异常标本的准确测定。Clausse定量法的缺点试剂成本高。操作建议：先进行D-Fbg筛选，超出正常值的标本再进行定量测定，以确保既降低试剂消耗又能保证报告结果的准确性。演算法Fbg(D-Fbg)的作用(2)50'