最新现代分离技术——天然活性成分的层析纯化策略课件PPT.ppt 77页

'现代分离技术——天然活性成分的层析纯化策略 层析方法：正相硅胶优点：经济、可常压操作、加压可提高效率局限性：不可逆吸附、使用大量有害有机溶剂、国产硅胶验证文件不健全2 层析方法：反相硅胶优点：常用于检测、少量制备，有硅胶基架的C4，C8，C18以及聚苯乙烯基架的SOURCE介质多种选择，分辨率高。局限性：成本高，介质昂贵、放大生产困难3 层析方法：葡聚糖凝胶优点：适合含羟基、氨基、羧基、芳香环的苷类、黄酮、多酚、丹宁等。可多次使用局限性：流速慢，比硅胶更适合亲水性物质，可与硅胶为互补技术。7 层析方法：离子交换优点：适合生物碱、有机酸等的分离。有些阴离子交换介质也适合苷类、皂苷、黄酮纯化，可多次使用局限性：受制于带电荷物质8 纯化平台：生物碱平台技术：〈PH3的酸水提取—阳离子交换SPSepharoseHP—中、高压硅胶反相生物碱带碱性，在传统的硅胶或氧化铝层析上效果往往不理想。SPSepharoseHP载量高、易于直接放大，对生物碱有特殊的选择性，可从酸水粗提物中分离结构近似的十几种生物碱，一步纯化可达60-80%的纯度。9 纯化平台：生物碱中、高压反相层析如Source15RPC或C18硅胶可将纯度提高到90%以上。Source是以聚苯乙烯为基架的反相介质，可耐受1M强酸强碱，比传统的如反相介质使用范围更宽广，寿命更长。10 纯化平台：有机酸平台技术：〉PH11的碱水提取—阴离子交换QSepharoseHP或SephadexLH20—中、高压硅胶反相有机酸多成盐，亲水性强。带负电荷，经QSepharoseHP一步纯化可达50%纯度，然后再上SephadexLH20可至90%以上。11 纯化平台：皂苷类平台技术：〉PH11的碱水提取—阴离子交换QSepharoseHP—中、高压硅胶反相皂苷同时具有强极性的糖基和弱极性的母核。皂苷含羧基12 纯化平台：黄酮苷类平台技术：水和醇提取—阴离子交换QSepharoseFF去色素—SephadexLH20—中、高压硅胶反相QSepharoseFF是去处植物色素的有效方法，可对提取物进行第一步纯化，SephadexLH20适合精细纯化13 纯化平台：黄酮、醌、多酚类平台技术：水和醇提取—SephadexLH20—中、高压硅胶反相SephadexLH2014 纯化平台：内酯、萜类平台技术：水和醇提取—中、高压硅胶反相管道化的加压硅胶层析可在密闭的环境下操作，大大提高生产速度、重复性、安全性、可控性。15 纯化平台：蛋白质、活性肽、动物毒素平台技术：Sepharose离子交换；Superdex/Sephacryl分子筛层析—Source　ＲＰＣ反相层析蛋白类物质在纯化时需留意保持其空间结构，避免失活，所以一般采取温和的离子交换和分子筛层析，寡肽分子则可使用反相层析16 纯化平台：多糖平台技术：水、醇提取—穿透式Sepharose离子交换脱蛋白—Superdex200/Sephacryl300-1000分子筛层析一种药材里可以含有多种类型的多糖，其结构、性质、功效不一。如香菇中含有水溶性、酸溶性、碱溶性多糖，综合利用分子筛及离子交换层析可进一步获得各组分纯品。多糖中的蛋白质可引起临床副反应，穿透式阴阳离子交换法可以一、两步快速去除多糖中残存的蛋白质，易于放大和自动化17 第七章病因与气血津液辨证 第一节病因辨证六淫证候　　　饮食劳伤疫疠证候七情证候　　　外伤 一、六淫证候六淫致病的特点：季节性、由外而侵犯人体、可以单独致病亦可结合致病三点。六淫包括：风、寒、暑、湿、燥、火六种邪气。 （一）风淫证候致病特点：风性轻扬开泄，易犯高位和肌表；善行数变，具有发病急，变化快，游走不定和动风的表现；风为百病之长，常与其它病邪合并侵犯人体。 临床表现：风邪犯表：发热，汗出，恶风，舌苔薄白，脉浮缓为主症。兼见头痛，鼻塞流涕，咳嗽。风郁皮肤：皮肤瘙痒，皮疹或风团。风中经络：肢体麻木拘急，甚则痉挛抽搐，颈项强直，角弓反张，或口眼歪斜，半身不遂。风兼寒湿，流注关节：关节游走性疼痛。 （二）寒淫证候致病特点：寒为阴邪，其性清冷，易伤阳气，出现寒冷现象；寒性凝滞，阻碍气血运行，出现疼痛寒性收引，出现筋脉拘挛收缩。 （二）寒淫证候临床表现：寒邪束表：恶寒发热，头身疼痛，无汗，咳喘，苔薄白，脉浮紧。寒邪直中：腹痛肠鸣，呕吐泄泻。寒袭关节：关节冷痛，拘急不利。 （三）暑淫证候致病特点：暑为阳邪，其性炎热，易耗气伤津，出现高热烦渴，身倦乏力；暑易伤心，出现心烦瞀乱，神昏不语暑多夹湿，出现胸脘满闷，恶心纳呆头身困重。 （三）暑淫证候临床表现：伤暑：身热汗出，口渴引饮，神疲乏力，小便短黄，舌红，脉虚数。中暑：壮热口渴，卒然昏倒，汗出不止，甚至昏迷惊厥，舌绛干燥，脉濡数。 （四）湿淫证候致病特点：湿性重浊，出现头身困重；湿性粘滞，故发病缓慢，病后缠绵；阻遏气机，易伤脾胃，出现脘闷纳呆，腹胀便溏；湿性趋下，易伤阴位。 （四）湿淫证候临床表现：伤湿：恶寒发热，胸闷脘痞，头身困重，大便稀溏，苔白滑腻，脉多濡缓。冒湿：头重如裹，身重肢困，脉濡弱。湿注关节：关节酸痛重浊，屈伸不利。 （五）燥淫证候致病特点：燥胜则干，易伤津液，出现口鼻干燥，皮肤干涩，尿少便干；肺恶燥，燥易伤肺，出现咽干喉痒，胸痛干咳；燥邪致病，有温燥、凉燥之分。 （五）燥淫证候临床表现：温燥：发热，微恶风寒，无汗或少汗，头痛口渴，干咳无痰和痰少而粘，或痰中带血，胸痛，尿少，舌红苔黄，脉浮数。凉燥：发热恶寒，无汗，头痛，咽干口渴，干咳少痰，舌苔薄白，脉浮。 （六）火淫证候致病特点：火为阳盛之邪，必见热象；易伤津耗液，出现咽干口渴，大便干燥，小便短赤；燔灼急迫，易动风动血，出现出血及热极生风；易扰心神，出现烦躁谵妄，狂乱；易致肿疡 （六）火淫证候致病特点：火为阳盛之邪，必见热象；易伤津耗液，出现咽干口渴，大便干燥，小便短赤；燔灼急迫，易动风动血，出现出血及热极生风；易扰心神，出现烦躁谵妄，狂乱；易致肿疡 二、疫疠证候是一类具有强烈传染性可造成大流行的致病因素致病特点：发病急骤；病情重笃；传染性强；症状相似； 二、疫疠证候临床表现：瘟疫证候：先恶寒后发热，继之壮热不寒，头身疼痛，头汗出，或见神昏谵语，舌苔白如积粉，脉数。疫疹证候：瘟疫证候中，以头痛剧烈，斑疹透露为主症者。瘟黄证候：瘟疫证候中，以卒然发黄为主症者。 三、七情证候七情：喜则气缓（心）　　悲则气消（肺）怒则气上（肝）　　恐则气下（肾）忧伤（肺脾）　惊则气乱（神）思则气结（脾）七情过度，损伤内脏，影响气机运行，导致气逆血乱，升降失常而发病。情志过度常与其相应的内脏发生病变。 三、七情证候㈠喜伤证候：喜则气缓，心神缓散，神不守舍，出现心神不安，精神涣散，甚则语无伦次，举止失常。㈡怒伤证候：怒则气上，肝气上逆，血随气逆，出现头痛眩晕，神昏暴厥，呕血。㈢思伤证候：思则气结，心血暗耗，脾失健运，出现心悸失眠，多梦健忘，纳呆形瘦。 ㈣忧伤证候：忧伤肺脾，肺气闭塞，脾失健运，出现情志抑郁，闷闷不乐，纳呆神疲。㈤悲伤证候：悲则气消，肺气耗伤，出现面色惨淡，神气不足。㈥恐伤证候：恐则气下，肾气不足，心肾不交，出现遗精滑精，二便失禁，怵惕不安，恐人将捕之。㈦惊伤证候：惊则气乱，神气被扰，神无所归，出现情绪不宁，甚至神志错乱，语言举止失常。 四、饮食劳伤㈠饮食所伤：饮食不节，损伤脾胃，纳运失职。伤胃则出现胃脘胀痛，恶闻食臭，恶心呕吐，吞酸嗳腐，舌苔厚腻，脉滑；伤肠则出现腹痛泄泻，大便臭秽，泻后痛减，苔厚腻，脉滑；中毒则出现腹痛如绞，吐泻交作。 四、饮食劳伤㈡劳逸所伤：过劳则伤气耗血，出现神疲乏力，少气懒言，头晕目眩，食欲不振，脉虚；过逸则郁滞气机，血行不畅，痰湿内生，出现肥胖肢软，心悸气短。 四、饮食劳伤㈢房劳所伤：房劳过度，耗伤肾精，出现腰膝酸软，眩晕耳鸣，发脱齿摇。阳虚则兼形寒肢冷，阳萎早泄；阴虚则兼潮热盗汗，五心烦热，午后颧红，多梦遗精。 五、外伤㈠金刃所伤：局部破损出血，红肿疼痛，活动障碍，或见金疮，伤口感染，溃烂成疮；或见破伤风，风邪毒气从伤口入侵，出现恶寒发热，牙关紧闭，呈苦笑面容，肢体抽搐，角弓反张 五、外伤㈡虫兽所伤：局部红肿疼痛，麻木，甚则肢麻，头晕，胸闷，昏迷。狂犬病则见畏水、畏光、畏声、痉挛抽搐。 五、外伤㈢跌仆所伤：局部疼痛红肿，出血，伤筋，骨折，甚则头晕，昏厥。 第二节气血辨证气血辨证就是分析判断疾病中有无气血亏损或运行障碍。 一、气病辨证㈠气虚证气虚证是脏腑功能减退所表现的证候。劳倦太甚，病后或久病体虚，衰老等均可引起此证。临床表现为神疲乏力，少气懒言，头晕目眩，自汗，动则尤甚，舌淡胖嫩有齿痕，脉虚。 ㈡气陷证气陷证是清阳不升，升举无力，反致下陷所表现的证候。可因气虚证发展而来，或劳累、骤然用力过度后损伤脏气而引起。临床表现为眩晕，倦怠乏力，少气懒言，久泻不止，腹部坠胀，或有脱肛，女子为子宫脱垂，舌淡，苔白，脉弱。 ㈢气不固证气不固证是气虚而固摄失职所表现的证候。临床表现为自汗易感；二便失禁；遗精，滑胎；各种出血等。㈣气脱证气脱证是元气亏虚之极，正气外脱的证候。临床表现为呼吸微弱，卒然昏到，面色苍白，形寒肢冷，手撒口开，二便失禁，脉微弱。 ㈤气滞证气滞证是人体某部或某脏腑之气机阻滞，运行失畅所表现的证候。原因有肝气郁结，失于疏泄、痰饮、劳倦、外邪、跌仆等均能引起。临床表现为胸胁脘腹胀满疼痛，嗳气等，常因情志不适而加重。 ㈥气逆证气逆证是气机升降失常，气上逆所表现的证候。以肺、肝与胃之气上逆较为多见。临床表现为肺气上逆为咳喘胸满；肝气上逆为头痛眩晕，甚则可见呕血、昏厥；胃气上逆为呃逆暧气、呕吐恶心。㈦气闭证气闭证是指七情过极，气机闭塞，神气郁闭的证候。临床表现为神昏或晕厥、肢厥等。 二、血病辨证㈠血虚证血虚证是血液不足，无以充养周身而出现的证候。凡脾胃虚弱，或七情、劳倦、久病，致使营血暗耗；或失血过多，或因虫证，耗伤血液等，均能引起血虚证。临床表现为头晕目眩，心悸失眠，手足麻木，面白唇淡，妇女则经少衍期或闭经，舌淡，脉细等。 ㈡血瘀证脏腑功能失调，致使血行受阻，或血溢于脉外，留滞体内，而为瘀血。产生的原因有感受寒邪，气滞，气虚及外伤等。临床表现为疼痛位置固定，刺痛拒按，夜间尤甚，面色黧黑，口唇爪甲青紫，肌肤甲错，皮下瘀斑，舌色暗紫有瘀斑，脉涩。 瘀血部位不同，症状亦随之而异。如瘀于肝则胸胁刺痛，胁下痞块；瘀于心则胸闷且痛，唇青，心悸；瘀于肠胃则呕血，便血。瘀于肺则胸痛咯血；瘀于胞宫则痛经，崩漏，经色紫暗有块，闭经，少腹作痛，腹现包块；瘀于肌表则见肿块，色青紫，刺痛。 ㈢血热证血热证是血分有热所表现的证候。因感受火热之邪，或因五志过甚、劳倦、房劳过度，使火热炽盛，热迫血分所致。临床表现为发热，身热夜甚，口干不欲饮，心烦失眠，甚则谵语发狂，出现斑疹，吐、衄、溺、便血等，舌红绛，脉数或弦数。 ㈣血寒证血寒证是由于寒邪入侵，造成气滞，导致血运不畅而引起的证候。临床表现为畏寒喜暖，手足疼痛，肤色紫暗，或少腹疼痛，遇寒则剧，得温则减，月经衍期，经紫量少，舌淡紫，脉沉迟涩。 三、气血同病辨证气血两者相依而不相离，病变时相互影响。气血同病的常见证候有以下几种。 ㈠气虚血瘀证气虚血瘀证是指气虚运血无力，血运瘀滞而出现的证候。临床表现为神疲乏力，少气懒言，自汗，身体某部刺痛拒按，面色淡白或暗紫，舌淡暗有瘀斑，脉涩无力。 ㈡气滞血瘀证气滞血瘀证是属气机郁滞与血瘀同时存在的证候。临床表现为胸胁胀满，偶或窜痛，情志抑郁，急躁易怒，胁腹出现肿块，刺痛拒按，妇女经闭或痛经，经色紫暗，夹血块，舌紫或有瘀斑，脉涩。 ㈢气血两虚证气血两虚证是指气虚与血虚并存的证候。临床表现为眩晕，神疲乏力，少气懒言，自汗，心悸失眠，肢体麻木，面色萎黄或淡白，舌色淡胖嫩，脉细弱。 ㈣气不摄血证气不摄血证是由气虚不能统摄血液，而致血液大量丢失的证候。临床表现为神疲乏力，少气懒言，眩晕，自汗，面色萎黄或淡白，舌淡胖嫩，脉细弱，以及各种出血表现，如吐血、衄血、便血、溲血、崩漏与皮下瘀斑等。 ㈤气随血脱证气随血脱证是指在大出血的过程中出现阳气外脱的证候。临床表现为在大量出血的同时，出现面色苍白，大汗淋漓，四肢厥冷，舌淡，脉微欲绝或浮大而散。 第三节津液辨证津液是体内各种正常水液的总称。津液的生成不足或丧失过多，就会出现津液亏损的证候；津液的输布、排泄障碍，就会导致水液停聚，而表现为湿、水、饮、痰等病理变化，并进而影响脏腑的功能。 一、痰证“痰”是水液内停而凝聚所形成的产物，其质稠粘。痰浊停阻于脏器组织之间，或见于某些局部，或流窜全身而表现的证候，是为痰证。 痰浊阻滞的部位不同，症状也不同。痰浊阻肺，咳嗽气喘，胸闷痰多。痰浊阻胃，纳呆恶心，呕吐痰涎，头晕目眩。痰阻心窍，神昏癫狂。痰停经络，肢体麻木，半身不遂。痰结皮下，瘰疬、瘿瘤、痰核、乳癖。痰阻咽喉，梅核气。 痰证因痰的性质和伴随症状不同又分为五种痰。风痰：痰白多泡沫，伴眩晕，喉中痰鸣，震颤抽搐，甚至卒然昏到，口眼歪斜，半身不遂。热痰：痰黄稠有块，伴有烦热便秘，甚至狂乱，舌红苔黄腻，脉滑数。 寒痰：痰白而清稀，伴有畏寒肢冷，骨痛，舌苔白腻，脉沉滑或沉迟。湿痰：痰白量多易咯，伴胸腹痞满，纳呆呕恶，头身困重，舌苔厚腻，脉濡滑。燥痰：痰少极粘难咯，伴口鼻干燥，咽干口渴，尿少便结，舌干少津，脉细数。 二、饮证根据饮邪停积的部位分为四饮。痰饮：饮停肠胃，表现为食欲不振，脘腹胀闷，肠鸣漉漉，素盛今瘦，舌苔白滑，脉弦滑。悬饮：饮停胸胁，表现为胸胁胀痛，咳唾引痛，气短息促，舌苔白滑，脉弦滑。 溢饮：饮停肌肤，表现为肢体浮肿，沉重而痛，小便不利，或恶寒发热，无汗，咳喘，舌苔白滑，脉弦紧。支饮：饮停于肺，表现为咳逆喘息，甚至不能平卧，喉中痰鸣，痰清稀量多，舌苔白滑，脉弦。 三、水停证病理性水液停聚主要表现是水肿。水肿分为阳水与阴水两大类。 ㈠阳水阳水为实证，又分风水相搏与水湿困脾两证。风水相搏证以头面眼睑先肿，迅速遍及全身为特点，伴有恶寒发热，无汗，脉浮等表证；水湿困脾证以全身浮肿，肢体困重，其势较缓为特点，伴有脘闷纳呆，恶心呕吐等脾胃运纳失职的表现。 ㈡阴水阴水为虚证，又分脾虚湿困与肾虚水泛两证。脾虚湿困证以全身水肿，肢体困重，腰以下肿甚为特点，伴有食欲不振，脘腹胀闷，大便溏烂等脾气虚证；肾虚水泛证以腰以下肿甚为特点，伴有腰膝酸软，畏寒肢冷等肾阳虚证。 水肿患者，无论阳水阴水，皆见尿少，舌苔滑，脉沉。风水相搏之阳水初起，脉可见浮，但全身水肿时仍为脉沉。 四、津液亏虚证津液亏虚证是指由于津液生成不足或亏耗过度，使周身或局部失其滋润濡养而引起的证候。临床表现为，燥于外则皮肤干枯；燥于内则烦渴；燥于上则双目干涩，口腔鼻咽干燥，唇干裂；燥于下则小便短赤，大便秘结。舌红少津，脉细数。 〖小结〗病因古有外因，内因，不内外因说，内因、不内外因致病均概括在脏腑辨证之中。此章仅以外因为重点。外因致病特点有三：一为多有季节性；二为六淫可单独致病，也可杂合而为病。三为初起常见表证。掌握风、寒、暑、湿、燥、火六淫致病的临床表现，对指导治疗有重要意义。 气血辨证包括气病、血病、气血同病三个方面。气病分为气虚类证和气滞类证。气虚类证包括气虚证、气陷证、气不固证、气脱证，此四证均有共同的气虚，机能减退的见症。气陷证多见中气下陷所出现的下坠感或脏器下垂；气不固证多见气虚失摄所出现的卫表不固，气不摄血及肾气不固等；气脱证则见阳气虚衰的亡阳证表现。 气滞类包括气滞证、气逆证、气闭证；气滞证的特点是胀痛；气逆分别表现为肺、胃、肝气上逆；气闭的特点是神昏。 血病分为血虚证、血瘀证、血热证、血寒证。血虚证见有不能充养全身的症状。血瘀证的特点是刺痛，固定不移；血热证的特点是出血兼热证；血寒证的特点是疼痛兼寒证。 气血同病中，气虚血瘀证、气滞血瘀证、气血两虚证的临床表现均是该复合证候的气病和血病证候的组合；气不摄血证是气虚证兼大出血；气随血脱证是大出血伴亡阳证。津液辨证中痰证依其痰的色质及伴随症状分为风痰、热痰、寒痰、湿痰、燥痰。饮证根据水饮停留的部位分为饮停肠胃的痰饮，饮停胸胁的悬饮，饮停肌肤的溢饮，饮停于肺的支饮。水停证根据虚实分为阴水和阳水。津液亏虚证是失于滋润的内燥证。'