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'微生物分类年 第一节通用分类单元分类是认识客观事物的一种基本方法。我们要认识、研究和利用各种微生物资源也必须对他们进行分类。分类学内容涉及三个相互依存又有区别的组成部分：分类、命名和鉴定。2 分类（classification）是根据一定的原则（表型特征相似性或系统发育相关性）对微生物进行分群归类，根据相似性或相关性水平排列成系统，并对各个分类群的特征进行描述，以便考察和对未被分类的微生物进行鉴定；命名（nomenclature）是根据命名法规，给每一个分类群一个专有的名称；鉴定（identification或determination）则是指借助于现有的微生物分类系统，通过特征测定，确定未知的、新发现的或未明确分类地位的微生物所应归属分类群的过程。3 其他:某属中一个种或几个种时，属后加sp.或SPP.Micrococcussp.(spp.)一种或一批小单孢菌当微生物是一个亚种或变种时，应按三名法命名既：学名=属名+种名+（subsp或var）+亚种（变种）名称排斜体排正体（可省略）排斜体（不可省略）如：椭圆酿酒酵母Saccharomycescerevisiae（subsp/var）ellipsoideus7 新名称的发表根据细菌命名法规的规定，有效发表新的细菌名称应在公开发行的刊物上进行，在菌种目录、会议记录、会议论文摘要的均不能视为有效发表。此外，若新名称是在国际系统细菌学杂志（IJSB）以外的其他杂志上发表的，还必须经过新名称的合格化发表，被认为合格后，在该杂志上定期公布，命名日期即从公布之日算起，否则不算合格发表，也不能取得国际上的承认。发表新名称时，应在新名称之后加上所属新分类等级的缩写词，如新目“ord.nov.”、新属“gen.nov.”、新种“sp.nov.”等。8 俗名（commonname）:普通的、通俗的、地区性的名字，具有简明和大众化的优点，但往往涵义不够确切，易于重复，使用范围局限。如绿脓杆菌：铜绿假单孢菌Pseudomonasaeruginosa白念菌：白色假丝酵母Candidaalbicans金葡萄：金黄色葡萄球菌Staphylococcusaureus9 常用的细菌分类术语培养物（culture),是指一定时间一定空间内微生物的细胞群或生长物。种（species),是生物分类中基本的分类单元和分类等级。是一大群表型特征高度相似，亲缘关系极其接近、与同属内的其他物种有明显差异的一大群菌株的总称。型（form或type),常指亚种以下的细分，当同种或同亚种不同菌株之间的性状差异，不足以分为心的亚种时，可以细分为不同的型。10 菌株（strain)或品系，从自然界分离得到的任何一种微生物的纯培养物都可以称为微生物的一个菌株；用实验方法（如通过诱变）所获得的某一菌株的变异型，也可以称为一个新的菌株，以便与原来的菌株相区别。模式菌株：一个被指定为能代表一个种群的菌株，是活体标本11 第二节微生物在自然界的地位科学家估计有分类纪录的各类物种大约有150万，其中微生物超过10万种，而且其数目还在不断增加。微生物学工作者要认识、研究和利用微生物或控制有害微生物，必须对它们进行分类（classification）。12 1、两界系统动物界Animalia：不具细胞壁，可运动，不进行光合作用。植物界Plantae：具有细胞壁，不运动，可行光合作用。三界：原生生物界Protista：（E.H.Haeckel,1866年提出）13 2、五界系统R.H.Whitakker,Science,163:150-160,1969原核生物界Monera：细菌、放线菌等原生生物界Protista：藻类、原生动物、粘菌等真菌界Fungi：酵母、霉菌动物界Animalia：植物界Plantae：五界系统是以细胞结构分化的等级以及和光合、吸收、摄食这三种主要营养方式有关的组织类型为基础的。六界：加上病毒界。14 3.三界（域）系统Woese用寡核苷酸序列编目分析法对60多株细菌的16SrRNA序列进行比较后发现：产甲烷细菌完全没有作为细菌特征的那些序列，于是提出了生命的第三种形式-古细菌(archaebacteria)。随后对包括某些真核生物在内的大量菌株进行了16SrRNA(18SrRNA)序列的分析比较，又发现极端嗜盐菌和极端嗜酸嗜热菌也和产甲烷细菌一样，具有既不同其他细菌也不同于其核生物的序列特征，而它们之间则具有许多共同的序列特征。三界(域)为：Bacteria(细菌)、Archaea(古生菌)和Eukarya(真核生物)。15 16 第三节各大类微生物的分类系统纲要一、原核生物分类系统细菌鉴定手册1.《伯杰氏细菌鉴定手册》（Bergey’s Manual of Determinative Bacteriology）（1923-1974的1-8版）2.《伯杰氏系统细菌学手册》（Bergey’s Manual of systematic Bocteriology, 1984）放线菌：中国科学院微生物研究所编著的放线菌目分科、分属检索表。克拉西里尼可夫（前苏联）“细菌放线菌分类手册”。瓦克斯曼（美）“放线菌分类”17 二、真菌的分类系统Ainsworth(1973)的分类系统。Ainsuorth and Bisby’s的《真菌学辞典》《Dictionary of the Fungi, Sixth.edition, 1971》18 1.经典鉴定分类法2.数值分类法3.化学分类法4.遗传分类法第四节微生物分类鉴定的方法19 四个水平：细胞的形态和习性水平：营养需求等细胞组分水平：细胞壁蛋白质水平：氨基酸核酸水平：碱基，16sRNA20 两大类方法：微生物鉴定的经典方法微生物鉴定的现代方法21 菌种鉴定的共同步骤：获得该微生物的纯培养物测定必要的鉴定指标查找权威性的菌种鉴定手册22 1.经典鉴定分类法一、形态学和生理生化特征1．形态学特征形态学特征始终被用作微生物分类和鉴定的重要依据之一，其中有两个重要原因：一是它易于观察和比较，尤其是在真核微生物和具有特殊形态结构的细菌中；二是许多形态学特征依赖于多基因的表达，具有相对的稳定性。因此，形态学特征不仅是微生物鉴定的重要依据，而且也往往是系统发育相关性的一个标志。常用于原核生物分类鉴定的形态学特征23 个体:细胞形态,大小,排列方式,染色,运动等形态特征:菌落形态营养要求:碳源,氮源,矿质元素生理生化特征:代谢产物种类,产量,显色反应酶:产酶种类和反应特征生态学特征:生长温度,氧需求,酸碱度,宿主种类血清学反应噬菌体的敏感性其他:全细胞蛋白的分析等24 细菌的培养特征25 与微生物的酶和调节蛋白质的本质和活性直接相关；代谢产物等营养类型；与氧的关系；对温度的适应性；对pH的适应性；对渗透压的适应性；酶及蛋白质都是基因产物；对微生物生理生化特征的比较也是对微生物基因组的间接比较；测定生理生化特征比直接分析基因组要容易得多；生理生化特征26 27 1、API细菌数值鉴定系统2、Enterotube系统3、Biolog全自动或手动细菌鉴定系统微型、简便、快速或自动化鉴定技术28 1、API细菌数值鉴定系统菌种基本培养基（液体）菌悬液检测、编码、查表、鉴定适用于API鉴定细菌有700多种AnalyticaProductsINC的简称。法国生物-梅里埃公司生产的细菌数值分类分析鉴定系统。约有1000种生化反应,可鉴定的细菌大于550种。目前中国各级疾病预防控制机构在细菌学检验中比较多地应用了此项技术29 30 2、Enterotube系统不同培养基分装不同小槽中，同步接种，培养后检测、查表、鉴定。31 该装置可做下列15种试验：葡萄糖产酸产气，赖氨酸和鸟氨酸脱羧酶，硫化氢，靛基质，乳糖和卫矛醇发酵，苯丙氨酸脱氨酶，尿素酶和柠檬酸盐,侧金盏花醇、阿拉伯糖、山梨醇和V.P试验等试验。查阅专门设计的结果判定表。Enterotube系统32 3、Biolog全自动或手动细菌鉴定系统在96孔的细菌培养板上检测微生物对不同发酵性碳源利用情况进行的分类鉴定。自动化、快速可鉴定细菌有1140多种、酵母菌267种、目前已经可用于丝状真菌。每个孔中含有不同的底物菌悬液或无菌水33 1.数值分类法现代鉴定方法34 即统计分类法，在200年前M.Adanson（1727-1806，法国植物学家）发表的分类原理基础上结合现代计算机技术发展而来的。主要观点：在一个分类群中，其所含信息量越大，即分类所依据的性状越多，其分类效果也越好；顺序建立自然分类单元时，每个性状都是等权的；任何两分类实体间的整体相似性，都是由每一对的相似性计算而来的；能够由类群间相似性的差异识别不同的分类实体；如果给予有关进化途径和机制的某些假定，可以从组群的分类学结构或从性状相关上作出种系发生的推论；分类学应作为一门经验科学来看待和实践；数值分类学是以表象相似性为基础的。35 测定100项以上的各种性状，利用计算机进行菌株的相互比较，并得出总的相似值。一般认为同种微生物菌株之间的相似值≧80%。36 37 细胞成分分析内容在分类水平上的作用细胞壁肽聚糖结构多糖种和属胞壁酸脂肪酸膜极性类脂种和属霉菌酸蛋白质氨基酸序列分析血清学比较属和属以上单位电泳图酶谱代谢产物脂肪酸种和属全细胞成分分析热解-气液色谱分析种和亚种热解-质谱分析2.化学分类法38 (1).DNA碱基比例的测定DNA分子含有四种碱基：腺嘌呤、鸟胞嘧啶胸腺.DNA的碱基组成和排列顺序决定生物的遗传性状.每一个微生物物种的DNA中的(G+C)mol%的数值是恒定的,不会随着环境及培养条件等的变化而变化,而且在同一个属不同种之间,GC含量不会差异太大,具有一定的范围,因此可以作为判定的微生物间亲缘关系的依据3.遗传分类法39 80年代以前螺菌属(Spirillum)不同的G+C含量高达38%～66%,后来伯杰氏手册(1984)结合其他特征已将其分为三个属:螺藻属、海洋螺菌属(Oceanospirillum)和水螺菌属(Aquaspirillum),它们的G+C含量分别为38%、42%～51%和49%～66%;过去根据形学特征曾认为球菌属(Micrococcus)葡萄球菌属(Staphylococcus)是关系很近的两个属,因而长期放在一个科里,由于G+C含量的差异表明它们的亲缘关系相当远,现在根据16SrDNA序列资料已进行新的调整.40 然而,值得强调的是:G+C含量的分类学意义主要是作为建立新分类单元的一项基本特征和把那些G+C含量差别大的种类排除出某一分类单元.测定DNA碱基组成的方法很多,常用的是:热变性温度法、浮力密度法和高效液相色谱法.细菌DNAG+C或A+T摩尔百分比能反映细菌间DNA分子同源程度，不同种属间G+Cmol%范围在25%~75%之间，但同一种细菌G+Cmol%相当稳定，不受菌龄、培养条件和其他外界因素影响.亲缘关系越近的细菌，G+Cmol%越相近，亲缘关系较远的细菌，G＋Cmol%也不同，但G＋Cmol%相同或近似其亲缘关系不一定相近。41 （2）核酸的分子杂交生物的遗传信息以（遗传密码）形式线性的排列在DNA分子中，不同DNA碱基排列顺序的异同直接反映这些生物之间亲缘关系的远近，碱基排列顺序差异越小，它们之间的亲缘关系越近，反之亦然。其基本步骤均是先提取菌株的DNA，加热变性解链，然后将两种变性的DNA（其中一种为标记DNA或rRNA）混合液在一定的温度下保温复性，重新得到杂交的双螺旋DNA分子，鉴定其双螺旋结合率。结合率的大小反映了DNA碱基序列的相似程度和菌种之间的亲缘关系的亲疏。42 核酸分子杂交在微生物分类鉴定中的应用包括：DNA—DNA杂交、DNA—rRNA杂交以及根据核酸杂交特异性原理制备核酸探针。(1)DNA—DNA杂交亲缘关系相对近的微生物之间的亲缘比较(2)DNA—rRNA杂交亲缘关系相对远的微生物之间的亲缘比较(3)核酸探针利用特异性的探针，用于细菌等的快速鉴定43 核酸分子杂交法遗传分类法44 (3).rRNA寡核苷酸编目分析遗传分类法一种通过分析原核或真核细胞中最稳定的rRNA寡核苷酸序列同源行程度,以确定不同生物间的亲缘关系和进化谱系的方法45 确定生物之间的进化关系，须挑选大分子来进行序列研究。在挑选大分子时应注意：①它必须普遍存在于所研究的各个生物类群中。所研究的是整个生命界的进化，那么所选择的分子必须在所有生物中存在，这样才便于分析和比较。②选择在各种生物中功能同源的大分子。催化不同反应的酶的氨基酸序列或者具有不同功能核酸的核苷酸序列不能进行比较，因为功能不相关的分子也意味着进化过程中来源不同，对这一类不相关分子进行比较也不期望他们会表现出序列的相似性。所以，大分子进化的研究必须从鉴定大分子的功能开始。46 ③为了鉴定大分子序列的同源位置或同源区，要求所选择的分子序列必须能严格线性排列，以便进行进一步的分析比较。④还应注意根据所比较的各类生物之间的进化距离来选择适当的分子序列。47 rRNA作为进化的指征大量的实验研究表明：在众多的生物大分子中，最适合于揭示各类生物亲缘关系的是rRNA,尤其是16SrRNA。16SrRNA所以被普遍公认是一把好的谱系分析的“分子尺”，这是因为：48 ①rRNA参与生物蛋白质的合成过程，其功能是任何生物都必不可少的，而且在生物进化的漫长历程中，其功能保持不变；②在16SrRNA分子中，即含有高度保守的序列区域，又有中度保守和高度变化的序列区域，因而它适用于进化距离不同的各类生物亲缘关系的研究；③16SrRNA相对分子质量大小适中，便于序列分析；④16SrRNA普遍存在于真核生物和原核生物中（真核生物中其同源分子是18SrRNA）。49 rRNA的顺序和进化培养微生物提取并纯化rRNArRNA序列测定分析比较微生物之间的系统发育关系50 ----致病菌检验检验程序----被检药物的预处理----增菌培养（提高检出率）----分离、纯化（获纯培养）----鉴别（定）试验--染色镜检--生化反应--血清学试验--毒力试验――报告51 §绿脓杆菌：检查要点：----染色镜检—革兰阴性短杆菌----鉴别（十六烷三甲基溴化铵）培养基—（淡）绿色带荧光的菌落----生化反应—氧化酶试验（+）、绿脓菌素试验（+）；若绿脓菌素试验阴性，则须明胶液化试验、硝酸盐还原试验、42°C生长试验均（+）。――报告：及时写出报告52 53 54 §金黄色葡萄球菌：检查要点：----染色镜检—革兰阳性球菌，葡萄样排列----鉴别（卵黄高盐）培养基—金黄色菌落----生化反应—凝固酶试验（+）、甘露醇试验（+）。――报告：及时写出报告55 第四章国际货物运输 海洋运输铁路运输航空运输集装箱运输国际多式联运大陆桥运输公路运输内河运输邮包运输管道运输 第一节海洋运输优点：1.通过能力强2.货运量大3.运费低廉4.对货物适应性强不足之处：1.运输速度慢2.航期不易准确预计3.风险较大 海洋运输按照船舶经营方式的不同，可分为：*班轮运输(LinerTransport)*租船运输(ShippingbyChartering) 班轮运输的特点：1.“四固定”：船舶按照固定的船期表，沿着固定的航线和港口来往运输，并按相对固定的运费率收取运费。2.装卸费包括在运费中，由船方负责配载、装卸，船货双方不计算滞期费和速遣费。3.船货双方的权利、义务与责任豁免，以船方签发的提单条款为依据。 班轮运费的计收：*基本运费：1.按货物毛重，称“重量吨”，运价表中用“W”表示2.按货物体积，称“尺码吨”，运价表中用“M”表示3.按毛重或体积计收，由船公司选择其中收费较高的作为计费吨，用“W/M”表示4.按商品价格计收，称“从价运费”，用“A.V.”表示。一般按货物的FOB价格的百分之几收取。 *附加运费：1.超重附加费8.港口拥挤附加费2.超长附加费9.燃油附加费3.选卸港附加费10.货币贬值附加费4.直航附加费11.变更卸货港附加费5.转船附加费12.洗舱费6.绕航附加费13.熏蒸费7.港口附加费14.冰冻附加费 1．广东A公司与法国B公司签订某商品出口合同。商品总毛重100公吨，400箱装，每箱体积为20厘米×30厘米×40厘米，单价为每箱USD55CFRMarseille。查表知该货为8级，计费标准为“W/M”，每运费吨运费100美元，另征收转船附加费20％，燃油附加费10％。试计算应收总运费。 2．某企业出口柴油机一批，总毛重为5.65公吨，总体积为10.676立方米。由青岛装中国远洋运输公司轮船，经香港转船至苏丹港。查表知柴油机属10级货，计费标准为“W/M”，10级货从青岛运至香港的费率为22美元/运费吨，香港中转费为13美元，香港－红海航线的费率为95美元，苏丹港要收港口拥挤附加费，费率为基本运费的10％。试计算该企业应付多少运费？ 3．某班轮从广州港装载人造纤维运往欧洲某港口，该货物的体积为20立方米，毛重为17.8公吨，计费标准为“W/M”，基本运费为80美元/运费吨，选卸港附加费率为每运费吨加收3美元。请问：（1）托运人应支付多少运费？（2）如果改用集装箱运输，海运费的基本费率为1100美元/TEU，货币附加费10％，燃油附加费10％，托运人是否应选择改用集装箱运输？（从节省海运费考虑） 租船运输的方式：1.定程租船(VoyageCharter)是指由船舶所有人提供船舶，在指定港口之间进行一个或数个航次，承运指定货物的租船运输。可分为单航次租船、来回航次租船、连续航次租船、包运合同。 定程租船装卸费用的划分方法：①船方负担装卸费(GrossTerms，LinerTerms或BerthTerms)②船方管装不管卸(FreeOut,FO)③船方管卸不管装(FreeIn,FI)④船方不负担装卸费(FreeInandOut,FIO)⑤船方不负担装卸、理舱和平舱费(FIOST) 2.定期租船(TimeCharter)是指由船舶所有人将船舶出租给承租人，供其使用一定时期的租船运输。承租人也可将此期租船充作班轮或程租船使用。 海运提单（B/L）性质和作用1.是承运人或其代理人出具的货物收据；2.是货物所有权的凭证，在法律上具有物权证书的作用；3.是承运人与托运人之间订立的运输契约的证明，本身并不是运输契约。 格式和内容托运人收货人被通知人收货地或装货港目的地或卸货港船名及航次唛头及件号货名及件数重量和体积运费预付或运费到付正本提单的份数船公司或其代理人的签章签发提单的地点及日期 有关提单的国际公约《统一提单的若干法律规则的国际公约》简称《海牙规则》《关于修订统一提单的若干法律规则的国际公约议定书》简称《维斯比规则》《联合国海上货物运输公约》简称《汉堡规则》 提单的分类已装船提单：承运人已将货物装上指定船舶后所签发的提单。备运提单：承运人在接管托运人送交的货物后，装船之前应托运人的要求签发的提单。 清洁提单：货物在装船时“表面状况良好”，承运人未加注任何有关货物/包装有缺陷，或其他妨碍结汇的批注的提单。不清洁提单： 记名提单：提单上的收货人栏内填明特定收货人名称，故不能流通转让。不记名提单：提单上的收货人栏内只填写“Tobearer”字样，或空白不填。故无须背书转让，流通性极强。指示提单：提单上的收货人栏内填写“Toorder”或“ToorderofXX”字样。故可经过背书转让。“空白抬头、空白背书”提单 直达提单：货物从装运港装船后，中途不换船而直接运到目的港使用的提单。转船提单：货物须经中途转船才能到达目的港而由承运人在装运港签发的全程提单。联运提单：货物经过海运和其他运输方式联合运输时由第一承运人所签发的包括全程运输的提单。 班轮提单：由班轮公司承运货物后所签发给托运人的提单。租船提单：承运人根据租船合同而签发的提单。银行或买方在接受这种提单时，通常要求提供租船合同的副本。 其他种类提单：甲板货提单：承运货物装在船舶甲板上所签发的提单。除非信用证另有规定，银行不接受甲板货提单。倒签提单：承运人应托运人的要求，签发提单的日期早于实际装船的日期的提单，以符合信用证对装船日期的规定，便于在该信用证下结汇。 过期提单：i）由于近洋运输，以致货物到达目的港时，收货人尚未收到提单，造成提货受阻。解决办法ii）卖方超过提单签发日期后21天才交到银行议付的提单，如信用证无特殊规定，银行拒绝接受。 海运单（SeaWaybill）1.是承运人或其代理人出具的货物收据；2.是承运人与托运人之间订立的运输契约的证明；3.不是物权凭证，不可转让。 海运单的流转程序：（1）承运人签发海运单给托运人；（2）承运人在船舶抵达目的港前向海运单上记明的收货人发出到货通知书；（3）收货人在目的地出示有效身份证件证明自己确系海运单中的收货人，并凭其签署完的到货通知书提货。 第二节其他运输方式（一）铁路运输1、国际铁路货物联运是指使用一份统一的国际联运票据，由铁路承运人负责经过两国或两国以上铁路的全程运输，并由一国铁路向另一国铁路移交货物时，不需要发货人和收货人参加。2、国际铁路联运运单是参加联运的发送国铁路与发货人之间订立的运输契约，其中规定了参加联运的各国铁路和收货人、发货人的权利与义务，对收货人、发货人和铁路都具有法律约束力。 承运货物收据运输契约货物收据结汇凭证提货凭证内地对港澳铁路运输中使用 （二）航空运输*班机运输*包机运输*集中托运*航空快递（“桌到桌”运输） 航空运单运输契约货物收据不是代表货物所有权的凭证，不能通过背书转让，收货人提货不是凭航空运单航空运单的收货人栏内，必须填写收货人的全称和地址，而不能做成指示性抬头。航空运单分为：主运单（由航空公司签发）和分运单（由航空货运代理公司签发）。 （三）集装箱运输1、集装箱运输的特点：*适用于海洋运输、铁路运输及国际多式联运，使单一的运输变为连贯的成组运输；*大大简化货运手续，为交接货物提供方便；*有利于提高运输质量，保证货物安全并减少货损货差；*装卸效率高，有利于加速车船周转和降低运输成本。 2、集装箱的规格——20英尺集装箱（可装货物重量约17.5公吨，体积约25立方米）——40英尺集装箱（可装货物重量约25公吨，体积约55立方米） 3、集装箱的种类*干货集装箱*冷藏集装箱*罐式集装箱*散货集装箱*台架式集装箱*平台集装箱*敞顶集装箱*汽车集装箱*动物集装箱 4、集装箱货物的装箱方式①整箱货（FullContainerLoad,FCL）②拼箱货（LessThanContainerLoad,LCL） （四）国际多式联运1、构成条件：*必须是国际间两种或两种以上不同运输方式的连贯运输；*必须有一个多式联运合同，明确规定多式联运经营人和托运人之间的权利、义务、责任和豁免；*必须使用一份包括全程的多式联运单据，并由多式联运经营人对全程运输负责。 2、多式联运单据*是多式联运合同的证明；*是多式联运经营人收到货物的收据和凭以交付货物的凭证；*根据发货人的要求，可以作成可转让的，也可以作成不可转让的。3、多式联运单据与联运提单的区别 第三节合同中的装运条款一、装运期（TimeofShipment）1.规定具体的装运时间。2.规定收到信用证后若干天装运。3.规定近期装运。immediateshipmentpromptshipmentshipmentassoonaspossible 二、装运港(PortofShipment)和目的港(PortofDestination)1.分别规定1个装运港与1个目的港。2.分别规定2个或2个以上的装运港或目的港。3.规定采用选择港的办法。——在两个或两个以上港口中任选一个；CIFLondon，optionalHamburg/Rotterdam——笼统规定某一航区的主要港口为装运港或目的港。 三、分批装运(Partialshipment)和转运(Transhipment)1.《UCP600》规定，允许分批装运和转运。为了避免不必要的争议，买卖双方是否同意分批装运和转运，应在合同中注明。2.在不同时间将不同港口的货物装在同一航次、同一条船上，不视为分批装运。3.只要其中任何一批没有按合同约定装运，根据《UCP600》，则该批和以后各批均告失效。 四、装运通知（ShippingAdvice）卖方应在约定的装运期开始前30天或45天向买方发出货物备妥通知；买方应将其所派船舶的名称及到港受载日期等事项及时通知卖方；卖方应在装船后，及时将货物装载情况向买方发出装船通知，以便买方及时投保货运险，并做好接货准备和安排办理进口通关手续。 五、装卸时间、装卸率和滞期、速遣费*便于随后签订租船合同。*按连续24小时好天气工作日计算装卸时间，对装卸港的法定节假日是否计算以及装卸时间的起止，也应作出具体的规定。*装卸率一般按照装卸港的正常装卸速度来确定。*速遣费通常为滞期费的一半。 六、OCP条款在同美国进行贸易时，为了享受美国内陆运输的优惠运费，可以采用OCP条款：货物最终目的地必须属于OCP地区。货物必须经由美国西海岸港口中转。提单上必须标明OCP字样，并且在提单的目的港栏中除填明美国西海岸港口名称外，还要加注OCP地区的城市名称。 案例讨论2009年8月21日，我国北方辉煌公司向英国B公司提出建议：以每台700英镑的价格按照CIF大连购买500台笔记本电脑。8月22日，B公司接到辉煌公司发出的发盘后，立即电告接受对方的报价。8月31日，B公司将500台笔记本电脑交给英国F运输公司装船运输。F公司发现其中有80台笔记本电脑包装破损，准备签发不清洁提单。但B公司为从F公司处拿到清洁提单，以便结汇，于是向F公司出具了承担赔偿责任的保函，F公司遂给B公司签发了清洁提单。B公司持清洁提单顺利结汇。辉煌公司于11月1日收到货物，发现80台笔记本电脑有严重质量问题，于是向承运人F公司索赔。试问：1）承运人F公司应否承担责任？2）如果辉煌公司向B公司索赔，索赔能否成立？'