最新牛津杯和打孔法抑菌试验课件PPT.ppt 29页

'牛津杯和打孔法抑菌试验 稀释法包括试管稀释法和微量稀释法，通过测试细菌在含不同浓度药物培养基内的生长情况，判断其最低抑菌浓度（MIC）。扩散法 药敏试验抗菌药物敏感性试验，简称药敏试验，是指对敏感性不能预测的分离菌株进行试验，测试抗菌药在体外对病原微生物有无抑制作用，以指导选择治疗药物和了解区域内常见病原菌耐药性变迁，有助于经验性治疗选药 二、实验材料培养基：牛肉膏蛋白胨固体培养基菌种：大肠杆菌（E.coli)金黄色葡萄球菌（Staphylococcusaureus)枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis)药品：阿莫西林、黄芪多糖、其他：牛津杯、培养皿、酒精棉、酒精灯、涂布器、移液枪、1mL、200uL枪头、恒温培养箱、超净工作台、接种环 “牛津杯”是放被测抗生素的不锈钢小管，小管内径为6mm，外径为8mm，高10mm的圆筒形管子，管子的重量尽可能相等。牛津杯 三、实验操作1.倒平板：将已灭菌的琼脂培养基加热到完全融化，倒在培养皿内，每皿约20ml，凝固。2.标记：菌种、牛津杯摆放位置、药物及其浓度3.制备菌悬液：用生理盐水洗下试管内的菌苔并稀释。4.菌液涂布：吸取1mL菌液入平板表面，用涂布器涂布将菌液涂布均匀 5.摆放牛津杯：在培养基表面垂直摆放牛津杯，轻轻加压，使其与培养基接触无空隙。6.加入待检药液：在杯中加入不同稀释度的药液或待检样品。7.孵育：加满后在37℃培养16~18h。8.结果报告：用毫米尺量取抑菌圈直径，参考表的标准判读结果，按敏感（S）、中介（I）、耐药（R）报 以牛津杯周围没有肉眼可见生长物区域为抑菌圈，根据抑菌圈直径大小判断细菌对抗菌药的敏感性。药敏试验结果判定标准：抑菌圈直径（毫米）＞20极敏感15-20高敏感10-14中敏感＜10低敏感0不敏感 注意事项在超净工作台中或酒精灯旁操作平板倒好，一定要平牛津杯立直，才能保证杯内抑菌物质均匀的向四周扩散牛津杯均匀摆放于培养基上，位置安排适中，防止出现抑制圈重叠，可在平皿中央摆一个，外周等距离摆5－6个。 思考题青霉素、头孢菌素类药物的抗菌机制如何？ 药敏试验抗菌药物敏感性试验，简称药敏试验，是指对敏感性不能预测的分离菌株进行试验，测试抗菌药在体外对病原微生物有无抑制作用，以指导选择治疗药物和了解区域内常见病原菌耐药性变迁，有助于经验性治疗选药 人有了知识，就会具备各种分析能力，明辨是非的能力。所以我们要勤恳读书，广泛阅读，古人说“书中自有黄金屋。”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识，培养逻辑思维能力；通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平，培养文学情趣；通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。有许多书籍还能培养我们的道德情操，给我们巨大的精神力量，鼓舞我们前进。 本章要点1.线型缩聚反应平衡及相对分子质量控制与分布2.缩聚反应动力学3.缩聚反应影响因素及获得高相对分子质量缩聚物的基本条件4.体型缩聚反应特点、基本条件及凝胶点的计算6.重要缩聚物如涤纶、尼龙、聚氨酯等的合成反应7.了解其他缩聚反应第2章逐步聚合反应5.缩聚反应方法 2.1缩合反应与缩聚反应酯化反应酰胺化反应 双官能团单体的多步缩合反应：由带两个或两个以上官能团的单体之间连续、重复进行的缩合反应称为缩合聚合反应，简称缩聚反应。 2.2逐步聚合反应单体2.2.1线型缩聚反应单体的类型1、单体通式a–R–bH2N(CH2)5COOHHO(CH2)5COOH属于均缩聚反应，得到均缩聚物。2、单体通式a–R–a+b–R"–bHOOCC6H4COOH+HO(CH2)2OHHOOC(CH2)4COOH+H2N(CH2)6NH2属于混缩聚反应，得到混缩聚物。 3、单体通式a–R–cH2N(CH2)5OH仅参加前面二类型的均缩聚或混缩聚反应而不能单独进行聚合，这叫共缩聚反应，产物叫做共缩聚物。合成一种线型缩聚物一般可有多种聚合反应路线和相应的单体，但是按照这些单体的合成难易、聚合反应的难易以及聚合物相对分子质量的高低，通常只有一两种单体是最符合条件的。 如，合成涤纶（聚对苯二甲酸乙二醇酯）理论上有下列3条合成路线可以选择，但是第3中路线才是工业化的。①对苯二甲酸与乙二醇进行混缩聚反应nHOOCC6H4COOH＋nHO(CH2)2OH=HO–[OCC6H4COO(CH2)2O]n–H+(2n–1)H2O ②.对苯二甲酸二甲酯与乙二醇进行酯交换聚合反应nCH3OOCC6H4COOCH3＋（n＋1）HO(CH2)2OH=HO(CH2)2O–[OCC6H4COO(CH2)2O]n–H＋2nCH3OH③对苯二甲酸双β羟乙酯进行分子间的酯交换聚合反应nHO(CH2)2OOCC6H4COO(CH2)2OH=HO(CH2)2O–[OCC6H4COO(CH2)2O]n–H+(n–1)HO(CH2)2OH 2.2.2单体的聚合反应活性◆遵守有机化合物相应缩合反应的活性规律◆与官能团所处的空间环境有关◆碳原子数与环化反应倾向大小单体缩聚反应活性规律 ClOCC6H4COCl>HOOCC6H4COOH>HO(CH2)2OOCC6H4COO(CH2)2OH聚合反应的活性递减–Cl>–OH>–O(CH2)2OH，电负性递减HCl>HOH>HO(CH2)2OH，酸性递减1、官能团活性规律举例酰卤活性>羧酸活性>酯活性 对苯二胺+对苯二甲酰氯反应活性较低2与官能团所处的空间环境有关间苯二胺+间苯二甲酰氯反应活性较高 3环化反应倾向大小羟基酸的聚合-环化反应倾向与碳原子数结论◆5、6元环的张力是最小，最容易环化。◆7、12元环的张力中等，稍有环化倾向◆其余环张力均较大，不容易环化 4-羟基丁酸HO(CH2)3COOH5-羟基戊酸HO(CH2)4COOH4-氨基丁酸H2N(CH2)3COOH5-氨基戊酸H2N(CH2)4COOH因此：凡是能够生成5、6元环的双官能团单体的环化反应占主导地位，无法进行聚合！。特别注意：含4、5个碳原子的氨基酸和羟基酸具有强烈的环化倾向而不能聚合。'