最新杨爱平肠道腺病毒检测及临床意义课件PPT.ppt 51页

'杨爱平肠道腺病毒检测及临床意义 防治原则肠道腺病毒诊断致病性与免疫性临床意义生物学特征定义及血清型主要内容2 一、定义及血清型3 流行性腺病毒胃肠炎广泛分布于世界各地，在小儿，发病情况仅次于轮状病毒性肠炎。最小发病年龄为1月，绝大多数发生于3岁以下的婴幼儿。Ad-40主要感染1岁左右婴儿，Ad-41则感染稍大的幼儿，全年均可发病，但腺病毒性胃肠炎一般呈散发性。7 肠道腺病毒通过消化道传播，主要原因是因为树突状细胞缺乏腺病毒受体，不能感染附近淋巴结。流行性8 腺病毒胃肠炎的潜伏期约10天，主要表现为腹泻，量少或多，呈水样便或稀便，少数可排出粘液，病程4-8天，常伴呕吐。部分患者有呼吸道症状，少数患者发热，病程多自限，排毒时间约1周。某些患者失水较严重，个别重度失水者可死亡。流行性9 各型腺病毒所致腹泻持续时间不等，以肠腺病毒胃肠炎腹泻时间最长，大多患者有呕吐，持续1-2天，少数有发热。非肠型腺病毒腹泻患者发热较多。约20％腺病毒肠炎患者有呼吸道症状。流行性10 二、生物学性状11 双链DNA病毒，二十面体立体对称，无包膜。引起婴儿病毒性腹泻。腺病毒电镜图腺病毒模式图12 培养特性：人类腺病毒无敏感动物，也不能在鸡胚中生长。但能在来源于人的多种细胞培养中增殖，引起明显CPE：细胞肿胀变圆、集聚成葡萄串状，并可在感染的细胞核内形成嗜碱性包涵体。生物学性状13 抵抗力腺病毒外膜无类脂质包膜，故能耐乙醚和氯仿等脂溶剂；并能耐受蛋白酶及胆汁的作用。但不耐热在室温中可存活10d以上，56℃30min灭活。生物学性状14 腺病毒的复制----严格按照日程表复制的病毒突出小结和六邻体都必须插入细胞表面的受体分子，病毒才能被细胞摄入，被内体包裹。在内体的酸性环境中降解，进入细胞质，将DNA释放到细胞核内。腺病毒利用自身的DNA聚合酶进行复制，先对一条亲代链进行互补复制，取代第二条亲代链，然后DNA聚合酶再对第二条亲代链进行复制，因此，病毒DNA的两条链都是连续的。15 三、致病性与免疫性16 对宿主防御的逃逸因为腺病毒复制缓慢，感染细胞容易受到宿主防御系统的攻击，因此腺病毒有1/4的基因组用来对付宿主的防御系统。通过释放两种E1B蛋白来抑制细胞的凋亡，使受感染的细胞能支持到病毒完成复制。致病性和免疫性17 感染后期病毒复制组装完成时，腺病毒产生病毒死亡蛋白给细胞致命一击彻底释放病毒。腺病毒制造VARNA来免遭干扰素的破坏，通过结合PKR，使之失活，使病毒蛋白质合成。18 阻止MHC-I类分子在病毒感染细胞上表达以阻止CTL的攻击。腺病毒合成RID蛋白结合病毒感染细胞的死亡受体以逃避天然杀伤细胞的攻击。病毒利用自身的聚合酶进行基因组复制，增加了抗原漂移的机会。19 腺病毒对呼吸道、胃肠道、尿道和膀胱、眼、肝脏等均可感染，人腺病毒约1/3的已知血清型通常与人类疾病相关，但一种血清型可引起不同的临床疾患；相反，不同血清型也可引起同一种疾患。20 呼吸道感染呼吸道感染的典型症状是咳嗽、鼻塞和咽炎，同时伴有发热、寒战、头痛和肌肉痛等，包括以下4种不同的综合征：1．急性发热性咽喉炎由C组病毒引起，出现咳嗽，鼻塞、发热和咽喉部溃疡等症状，这些表现难以与其他病毒引起的轻型呼吸道感染鉴别2．咽结膜热多由B组腺病毒3和7型所致，愈后尚好，一般无后遗症。3．急性呼吸道疾病多由腺病毒4、7型引起，也可见于3型4、肺炎腺病毒肺炎约占儿童期肺炎的10%，多由腺病毒3、7型引起；在青年人腺病毒肺炎的病死率为8%～10%21 眼部感染腺病毒致轻型眼部感染是呼吸道感染和咽喉炎的并发症。滤泡性结膜炎可由许多型腺病毒引起，类似于衣原体性结膜炎，而且为自限性。由腺病毒8、19和37型引起的角结膜炎为重型感染，具高传染性，以急性结膜炎开始，扩至耳前淋巴结，随后发生角膜炎。胃肠炎许多腺病毒在肠道细胞中复制，随粪便排出，但大多血清型与胃肠道疾病无关。而40型和41型腺病毒可引起婴幼儿与年少（4岁以下）儿童的胃肠炎，致腹痛、腹泻。C组腺病毒能引起某些婴幼儿肠套叠。22 其它疾病腺病毒11、12型能引起儿童急性出血性膀胱炎，尿中出现病毒。37型可引起女性宫颈炎和男性尿道炎，常由性传播感染。在免疫功能低下者可引起偶发或严重的病毒感染，尤其在器官移植病人中发生严重呼吸道感染和病毒性肝炎，多由1、5和7型腺病毒引起。艾滋病患者可感染多种血清型腺病毒，并能出现抗原性介于中间的杂合型毒株，而且常为致死性腺病毒感染。主要原因是腺病毒的E1A蛋白可反式激活HIV的转录，加速HIV的复制。临床发现37%的艾滋病患者病毒性腹泻是由腺病毒所致。23 免疫性腺病毒感染后，产生特异性抗体，对同型病毒的感染有保护作用，免疫力持久。致病性和免疫性24 四、肠道腺病毒诊断25 传统方法病原分离培养后,应用亚属特异的免疫荧光测定法、放射免疫测定、ELISA、DNA杂交等进行腺病毒亚属的鉴定。再应用型特异性血清进行中和试验。缺点：不仅费时费力,结果也不够理想26 病毒分离：标本（患者咽喉、眼分泌物、粪便等）敏感细胞CPE分离株为抗原，用抗病毒诊断血清作CF试验，确定是否为腺病毒；用已知腺病毒型特异性免疫血清做NT试验可定型。亦可用直接或间接免疫荧光方法，检测临床诊断疑为腺病毒肺炎的婴幼儿鼻咽部脱落细胞中的腺病毒抗原。微生物学检查法27 血清学诊断采取患者早期和恢复期双份血清做CF试验、HI试验及NT试验。恢复期血清抗体滴度比早期增长4倍以上有诊断意义。其中CF试验最为常用。微生物学检查法28 ELISA方法检测ADV抗原、抗体操作简单、快速、特异性强，有助于临床对疾病的早期明确诊断，结果判定用简单的分光光度计，客观准确，3～4h即可出结果，可大批检测，阳性率远优于病毒分离，亦优于血清学技术，适用于流行病学调查。IgM产生早于IgG，有利于早期诊断，IgG产生稍晚，虽不能早期诊断，但相当一部分在7一14天内检测单份血IgG阳性再结合临床也可诊断。29 胸部X线及CT影像表现肺内表现以多肺叶受累的肺实变为主要特征，其中团簇状影尤为突出，此类团簇状影有较明显的特征性，常密度较高、边缘模糊、强化均匀。肺外表现以胸膜增厚和少量胸腔积液为主，少数患者出现纵隔气肿或气胸。小气道改变多见。30 分子生物学Alland和Saitoh-Inagawa在六邻体基因的β-管状物形成P1区设计了一对引物，应用PCR结合RFLP,即将腺病毒的特定序列用PCR扩增后,其产物再用限制性内切酶进行酶切图谱分析优点：法分辨率高、重复性好、简单快速31 浙江萧山医院目前检测方法腺病毒抗原检测试剂盒（胶体金法）阳性率3.7%（12/322）平均年龄：8月龄，最大15月龄，最小4月龄。北京万泰PCR-荧光探针（EV71、肠道病毒通用引物、柯萨奇病毒）阳性率12.5%（1/8）湖南圣湘32 五、防治原则33 腺病毒感染主要在冬春季流行，通过呼吸道和接触传播，其预防措施和预防其他呼吸道传染病相似，主要是勤洗手，勤消毒，避免接触患者及其呼吸道飞沫；平常多饮水，多吃蔬菜和水果，注意锻炼身体；室内多通风，保持清洁；冬春流行季节尽量少去人员密集的公共场所，外出时戴口罩，以防感染。防治原则预防34 正在使用和试用的疫苗有甲醛灭活疫苗和减毒活疫苗。但因腺病毒对新生地鼠有致癌作用，人们对于疫苗的作用难免有疑虑。最近有人研制腺病毒衣壳亚单位疫苗，可解决疫苗的安全性问题。目前尚无特效治疗方法防治原则疫苗35 腺病毒肠炎病情不重，一般不治自愈。主要是对症治疗及必要的支持疗法。有轻度失水可口服补液，中或重度失水宜静脉补液。防治原则对症处理36 临床意义根据实验室检查及时明确病原微生物，做到病因学诊断；对于肠道病毒性腹泻应及时停用抗菌药物，调整治疗方案，使用肠黏膜保护剂及微生态制剂，避免滥用抗菌药物引起的菌群失调。坚持以切断传播途径为主导的综合性预防措施，加强对水源和食物的监控与管理，可使感染性腹泻的发病率降低37 思考题肠道腺病毒采取了哪些措施来对付宿主防御系统的攻击？38 高考语文答题时间、分配策略 一、总体原则总共150分，考试时间150分种，平均每分钟得1分。要给作文留足至少50分钟的时间。 二、各个题型时间分配1.论述类文本阅读，3道选择题，共9分，大约需要10分钟。2.文学类文本阅读，1道选择题，2道简答题，共14分，大约需要15分钟。3.实用类文本阅读，2道选择题，1道简答题，大约需要15分钟。4.文言文阅读，3道选择题，1道翻译题，共19分，大约需要16分钟。 5.古代诗歌阅读，1道选择题，1道简答题，共11分，大约需要10分钟。6.名篇名句默写，6个空，共5分，控制在2分钟左右。7.语言文字运用，大约需要20分钟。8.作文，共60分，最少需要50分钟，这是底线。即使时间不够，最好也有一个提纲，再动笔。 开考后前5分钟1.发卷前，首先暗示自己：这只是一次平常测验！我自信，所以我成功！2.接到试卷，要不慌不忙地在规定处按要求写上姓名、填涂考号、贴好条形码，然后检查试卷、答题卡是否有缺漏、破损情况。3.接下来快速浏览全卷，大体弄清试卷的版块结构、各种题型，此时切忌一边看题一边急着抢时间考虑答案，因为你不能指望哪道题可以一眼看出答案。对于作文，无论是什么题型，无论是否熟悉，都不必深想，相信自己一定有话可说，一定可以写好。大体浏览一遍，心情就会慢慢放松，等到答卷铃响，就可集中精力答卷。 开考后前30分钟1.做选择题力避两种倾向：一是一味抢时间、求速度，这样势必导致审题不严，思考不周密，从而出现不应有的失误;二是速度过慢，太过谨慎小心，甚至反复徘徊不敢选。2.选择题审题要细，一定要看清选是还是选非，可以在题目的正确与不正确等这样一些字眼上加上着重号或圈出来。3.做选择题要有一次成功的意识，既注意考点设置，又要凭借语感。如有二选一时干扰性极强的情况，也一定要在认真辨析的前提下，定下一个预选答案，这时可在题号前打一个问号，以备做完后有针对性地检查。 4.选择题每做一题，必须在题号前写明答案，切忌在选项上打，这样可能导致填涂失误;也不要选定一个便手忙脚乱在卡上填涂一个，这样会阻碍思维。5.选择题全部做完后，便集中时间填涂答案，要注意：首先在所选答案的方框内一次性做好记号，如打小勾，或者涂黑点，并按题号再一一核对无误，然后一次性按要求规范填涂。 开考后30-90分钟1.即开考后一个半小时内要完成作文以外的所有试题。2.因为是网上阅卷，同学们在答主观题时一定要有强烈的规范意识：一是书写规范，卷面整洁。答题卡上不允许书写潦草，乱涂乱画;二是对号入座，按题号在规定的矩形框内作答。绝对不能张冠李戴甚至私自改动题号，这样会导致扫描无效，判分为零。三是分条列点，要点分明，表述规范。主要是诗歌鉴赏与现代文阅读中的一些题型，一定要据分值设定要点，先观点后阐释。 最后1个小时1.作文时间要确保50分钟，利用10分钟左右的时间审题立意，并列好提纲，然后用40分钟左右的时间形成文字。2.作文要力避扣分点：缺题扣2分，字数每少50字扣1分，错别字或卷面脏乱扣分，不完篇扣分等。3.网上阅卷，书写以清晰、整洁为原则。字不宜过小或大而潦草，或用力过轻;如有写错处，字数少可用橡皮擦，字数多最好用直尺在上面划一横线，不允许用其它方式夸大暴露问题。4.留下3到5分钟做全卷的检查，不要轻易改动选择题答案。 作文评分标准将试卷分为四大类：一类卷：60—50分，二类卷：49—43分，三类卷：42—36分，四类卷：35分以下。 套作、文体不明确的适当扣分。抄袭的，“基础等级”在第四等之内评分，“发展等级”不给分。对不够字数的作文的评判规定1.600字以上但不足800字的，结构完整，按每50字1分的标准扣分，结构不完整，35以下评分；2.400字以上但不足600字的，结构完整，30以下评分，结构不完整，25以下评分。3.400字以下的，20以下评分。有题目，写300字以内的，给15分。有题目，写200字以内的，给10分。有题目，写100字以内的，给5分。4.只有题目，其他没有的，给2分。 '