最新1液相色谱基本原理课件PPT.ppt 84页

'1液相色谱基本原理 1、色谱方法概况2 组分为何要进行分离定量定性联用技术样品纯化成分分析分离3 液相色谱的分类反相色谱是目前使用最普遍的一种色谱方法7 吸附法固定相为固体硅胶和氧化铝最常用的固定相通过一系列的吸附/脱附步骤形成分离溶质与溶剂均吸附在固定相极性端样品分子对固定相的吸附程度不同而形成分离固定相流动相8 分配法溶质在液固两相间的相对溶解度不同而达到分离与固定相亲和力强的物质其保留时间也较强两种基本操作模式正相分离：极性固定相、非极性流动相反相分离：非极性固定相、极性流动相固定相流动相9 分配法正相与反相分离正相色谱反相色谱非极性流动相极性流动相10 非极性相互作用范德华力NH2SO3-硅胶基体键和官能团(C8)11 偶极性引力、氢键硅胶基体极性相互作用ONCOOHOHOHH12 尺寸排阻色谱依照分子大小分离固定相材质具有不同大小孔径大分子因其经过的路径短，所以先流出主要应用于聚合物、蛋白质等分子量范围的测定13 离子交换色谱固定相表面带与被分析物相反电荷一般使用弱离子交换树脂根据电荷相互作用力的强弱产生分离固定相流动相14 离子交换相互作用力静电吸引力硅胶基体NH3+OHCO2HSO3-CO2-OCON(CH3)2+N15 色谱发展的历史16 色谱发展的历史（续）17 液相色谱仪器组成柱温箱自动进样器泵系统溶剂瓶架紫外或DAD检测器其他检测器18 流动相储液瓶单元或多元泵梯度混合器预柱手动进样器自动进样器保护柱色谱柱柱后反应器柱温箱检测器馏分收集器积分仪工作站计算机接口温度控制单元样品制备单元液相色谱仪器结构组成示意图19 液相色谱的应用20 2、液相色谱基本原理21 色谱基本理论色谱的主要理论热力学理论以相的平衡观点研究色谱过程塔板理论为代表(Martin&Synge)动力学理论以动力学观点研究各种动力学因素对色谱峰的影响VanDeemter方程为代表22 分离的原理样品组分在固定相和流动相之间的分配流动相带动样品经过色谱柱不同组分与固定相之间相互作用的强度不同不同组分在固定相上移动速度不同，形成分离分配系数KDXmXsKD1=[Xs]/[Xm]YmYsKD2=[Ys]/[Ym]固定相流动相23 样品组分的分离进样、分配、移动、流出、分离KD2