最新第10课-节日信息收集课件PPT.ppt 20页

'第10课-节日信息收集 谁是猜题王题片图中秋节 谁是猜题王题词诗《清明》（唐）杜牧清明时节雨纷纷，路上行人欲断魂。借问酒家何处有？牧童遥指杏花村。清明节 任务一：选择合适的关键词，搜索有关传统节日信息温馨提醒：1.注意关键字的选择2.不要打开太多的页面3.找到的网站要求：有图有文字；页面清晰，内容一目了然 任务二：合理选择信息，将搜索到的节日资料保存到D盘文件夹中温馨提醒：1.注意保存方法的选择2.有困难可以参考小锦囊和书本3.将不同的节日资料保存到不同的文件夹中4.网页保存类型的选择 思考网页保存和分类保存的区别？网页保存：资料完整分类保存：目录清晰 任务三：分类存放下载的节日信息，并填写任务单。温馨提醒：1.将不同的节日资料保存到不同的文件夹中2.任务单的填写要简洁清晰 小结 PCR产物的回收 一、实验目的及背景在生物技术实验中，ＰＣＲ反应获得的目的片段，酶切后所得特定的ＤＮＡ序列，分子杂交中所制备的探针等，经过琼脂糖凝胶电泳后，目的片段与其它ＤＮＡ分开，这就需要有一套方法将目的ＤＮＡ从凝胶中分离出来，通过处理后得到纯化的目的ＤＮＡ，以用于以后分子杂交，重组子构建，序列分析等。 从凝胶中分离回收ＤＮＡ的方法现在常用的技术有：电洗脱法低熔点琼脂糖凝胶法玻璃奶法快速纯化凝胶回收试剂盒 低熔点琼脂糖凝胶法65oC琼脂糖凝胶熔点低熔点琼脂糖凝胶37oC液体 电洗脱法基本原理将电泳分离后含目的ＤＮＡ片段的琼脂糖切割下来，装于透析袋中，继续在高电压下电泳，这时目的ＤＮＡ会从凝胶中电泳出进入透析袋中，由于ＤＮＡ分子量大，不能透过透析袋，从而保留于透析袋中。取出透析袋中含ＤＮＡ的溶液，进一步用酚、氯仿抽提纯化。 二、实验试剂及仪器DNA回收试剂盒琼脂糖电泳仪、电泳槽紫外检测仪手术刀 三、实验步骤切取琼脂糖凝胶中的目的DNA条带，放入干净的离心管中称重，如凝胶重为100mg，可视为100μl（100mg≈100μl），以此类推。加入3倍体积溶液GSB，于55℃水浴融胶6-10min，间断（2-3min）混合，确保胶块完全融化，当胶完全融化后，观察溶液的颜色，如颜色为紫色，加入适量3M醋酸钠（pH5.2），调整颜色和GSB颜色相同（黄色）。（为增加DNA回收量，可加入1倍体积异丙醇于已融化的凝胶溶液中，如凝胶重为100mg，加入100μl异丙醇）。待融化的凝胶溶液降至室温（高温时吸附柱结合DNA能力弱），加入吸附柱中静置1分钟，10,000×g离心1分钟，弃流出液。 4.加入650μl溶液WB，10,000×g离心1分钟，弃流出液。5.10,000×g离心1-2分钟，去除残留的WB。6.将吸附柱置于一干净的离心管中，在柱的中央加入30-50μlEB或去离子水（pH＞7.0）（EB或去离子水在60-70℃水浴预热，使用效果更好），室温静置1分钟。7.10,000×g离心1分钟，洗脱DNA。将洗脱出的DNA于-20℃保存。 结果与分析１．分析ＤＮＡ回收效果。２．记录电泳结果。'