最新第十三章 生化药物分析概论课件PPT.ppt 32页

'第十三章生化药物分析概论 本章主要内容生物药物种类与特点生物药物质量检验的基本程序与方法生物药物理化测定法：HPLC法、酶法、电泳法中国药科大学药物分析教研室 生化药物生物制品（生物技术药物）生物药物（biopharmaceuticals）：利用生物体、生物组织和器官制得的天然活性物质及其类似物一、概述分类没有严格的界限中国药科大学药物分析教研室 胰脏(A)n胰岛素原mRNAcDNA重组质粒转化细菌mRNA反转录酶胰岛素原基因与质粒连接感染E.coli胰岛素原重组胰岛素原的合成中国药科大学药物分析教研室 基因工程药物主要类别蛋白质多肽类：激素类及神经递质类细胞因子类酶及凝血因子类核酸类：反义寡核苷酸等人生长激素释放抑制因子（HumanSomatotin）干扰素（HumanInterferons）链激酶（Streptokinase）中国药科大学药物分析教研室 5.生化药物和基因工程药物特点1）共同特点：活性强，毒副作用小2）分子量大，结构确证难3）全过程的质量控制：从原料、菌种到生产设备、中间体、产品4）生物活性检查5）安全性检查：异常毒性检查、过敏物质检查、外源性DNA残留量、宿主菌蛋白残留量等6）效价（含量）测定中国药科大学药物分析教研室 收录于《中国药典》和《中国生物制品规程》二、检验的程序和方法鉴别杂质检查安全性检查含量（效价）测定中国药科大学药物分析教研室 1.鉴别1）理化鉴别法：UV、肽图等反应序列信息RP-HPLC法分析重组人胰高血糖素类多肽－1（7－36）肽图谱《药物分析杂志》2005，25(1)24-26标准品样品胰蛋白酶酶解V8蛋白酶酶解rhGLP-1(7-36)由30个氨基酸组成，结构中含2Lys、1Arg、1Asp、3Glu中国药科大学药物分析教研室 2）生化鉴别法：免疫法、酶法、电泳法等3）生物鉴别法：动物试验等专属性强，应用广泛免疫双扩散法SDS-PAGEMarkerSample116.0k66.2k45.0k35.0k25.0k18.4k14.4k中国药科大学药物分析教研室 2.杂质检查1）一般杂质：氯化物、重金属、水分等2）特殊杂质：有关物质等高效凝胶过滤色谱法(HighPerformanceGelFilter，HPGFC）、RP-HPLC萄聚糖凝胶立体网状结构图中国药科大学药物分析教研室 标准蛋白色谱图时间(min)048121654321.右旋糖酐蓝2.醛缩酶3.血清白蛋白4.碳酸酐酶5.抑蛋白酶肽6.酪氨酸中国药科大学药物分析教研室 重组人肿瘤坏死因子相关调亡诱导配体（rhTRAIL）质控方法和质量标准的研究《药物分析杂志》2005，25（3）253-257Synmetry300C18柱（3.9×150mm）中国药科大学药物分析教研室 3.安全性检查1）热原检查家兔法、鲎试剂法2）降压物质检查3）过敏试验4）异常毒性试验豚鼠、大鼠存活试验5）无菌试验6）宿主细胞蛋白残留、DNA残留ELISA法中国药科大学药物分析教研室 1）理化分析法：重量法、滴定法、电化学法、光谱法色谱法（HPLC法）4.含量（效价）测定例：蛋白质含量测定（ChP2005三部）凯氏定氮法Lowry法双缩脲法中国药科大学药物分析教研室 2）生化分析法酶法：免疫分析法酶活力测定法以酶为分析对象进行分析酶分析法以酶为分析工具或分析试剂的分析方法中国药科大学药物分析教研室 3）生物检定法药物对生物体或离体器官所起的生物活性测定效价时采用参考品，体内、体外方法测定活性，计算效价IU同时测定蛋白含量，计算特异比（比活性，IU/mg）中国药科大学药物分析教研室 例：冻干基因工程α1b干扰素制造及检定规程本品系用从健康人白细胞中获得的α1b干扰素基因重组质粒，传染大肠杆菌，使之高效表达人α1b干扰素，经高度纯化后冻干制成。用于治疗慢性乙型肝炎、丙型肝炎和毛细胞白血病等疾病。主要包括以下内容：1菌种2发酵3收菌4菌体裂解与粗制干扰素制备5浓缩与纯化6稀释、除菌过滤7半成品检定8除菌半成品检定9成品检定10规格11保存与效期12冻干基因工程α1b干扰素使用说明书中国药科大学药物分析教研室 检查：纯度：1电泳纯度2高效液相色谱纯度pH值水分鉴别：分子量测定肽图测定等电聚集紫外光谱扫描外观半成品和成品的检验项目包括：中国药科大学药物分析教研室 安全性检查：残余外源性DNA含量残余IgG含量残余工程菌蛋白含量抗生素活性无菌试验热原质试验异常毒性含量：效价测定：细胞病变抑制法蛋白含量比活性中国药科大学药物分析教研室 学习描写景物 了解学会描写景物的意义：烘托环境、渲染气氛，用以帮助人物表达当时的思想情感 了解并掌握写景的方法：（一）、观察（事物）：形、色、声、态、气(味）。观察事物要细致，要调动各种感官，从视、触、听、味、嗅觉等方面去入手观察的方法:(1)定点观察法(2)移步换景法 6（二）、描写:就是抓住事物特征，运用比喻、拟人等修辞表现事物的形、色、声、态、气等方面，运用语言把它描述出来。（三）注意观察和描写的层次清楚:从上到下从左到右从内到外从大到小从春到冬从东到西从主到次从近到远从早到晚等等（空间顺序和时间顺序）注意：写景抒情，要情景交融。 例如：1、一切都像刚睡醒的样子，欣欣然张开了眼（）（）（）2、风里带来些新翻泥土的气息，混着情操味儿，还有各种花的香，都在微微润湿的空气了酝酿。（气味的观察）（嗅觉）3、雨、是最寻常的，一下就是三两天。可别恼。看，像牛毛，像花针，像细丝（形的观察），密密的斜织着，人家屋顶上全笼着一层薄烟。（态的观察）（比喻）（视觉）4、他们的房屋稀稀疏疏的，在雨里静默着。（态的观察）（拟人）（视觉）态的观察拟人视觉 5、看吧，山上的矮松越发的青黑（色的观察），树尖上顶着一髻儿百花，好像日本看护妇（形的观察）给山们镶上一道银边（色、形的观察）（拟人、比喻）（视觉）6、快到日落的时候，微黄的阳光斜射在山腰上，哪点薄雪好像忽然害了羞，微微露出点粉色。（色、态的观察）（拟人）（视觉）7、晚霞像火焰一般燃烧，遮掩了半个天空。（色、态的观察）（比喻）（视觉）8、这时候一辆大车轧轧地响着，（声的观察）（听觉）9、鸟儿将巢安在返还嫩叶当中，高兴起来了，呼朋引伴地卖弄清脆的喉咙，唱出婉转的曲子，跟清风流水应和着。（色、态、声的观察）（拟人）（视觉、听觉）10、“吹面不寒杨柳风”，不错的，像妈妈的手抚摸着你。（比喻）（触觉） 7写作我们这里，山清水秀，美景处处。小溪、果园、山坡、池塘、竹林、村庄、田野…哪里不是美景呢？春天风和日丽、山花烂漫、春水渙渙、鸟语花香；夏天蓝天白云、禾苗茵茵、青山绿水、稻穗飘香；秋天硕果累累、收割景象、山色斑斓、五彩缤纷；冬天寒风呼啸、雪花飘飘、白雪皑皑、张灯结彩，喜气洋洋……大到名胜景点、村庄院落，小到一个花园、一条小溪、一片竹林都可以写。 9要求：1、自选题材自拟题目如：校园一角、我家的果园、灿烂的桃林、美丽的小溪、漂亮的池塘、迷人的田野、新村焕彩、梦幻般的湖金色的田野等等2、写一段100---200字的文字，把你所见到的美景描写出来，向同学们展示。（看谁写得又快又好！） 10一、同学之间相互阅读作文（2---3份）（尽量多读同学作文）二、相互阅评同学作品（1份）（下简短评语1、2、3、）三、“奇文共欣赏、疑义相与析”优作推荐与欣赏、师生共评（3---5份）四、教师小结,肯定成绩，指出不足，提出补救措施。 10祝同学们：学习愉快，在努力中进步！谢谢大家'